图 2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果?

疫情的阴霾挥之不去,笼罩在每一个中国人的心中 。疫情严峻,如何准确识别患者成为关注焦点 。2月7日下午,三份新冠肺炎患者咽拭子样本呈阴性的消息迅速传开,最终通过下呼吸道样本确诊 。
目前官方推荐的两种新冠肺炎(novel,NCP,以下简称“新冠肺炎”)的诊断方法都是基于病毒的核酸检测和基因测序,只要核酸检测呈阳性,或者基因测序与已知的新冠肺炎一致 。任何一种具有高度同源性的病毒都可以被诊断出来 。其中,核酸检测是新冠肺炎最终诊断的金标准 。

图  2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果?

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1.什么是核酸检测?
聚合酶链式反应(chain,PCR)常用于新型冠状病毒的核酸检测 。PCR可以实现遗传物质的快速扩增,可以区分DNA序列和RNA序列 。它常用于癌症、感染和遗传疾病的诊断 。研究等
【图2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果?】目前比较常见的采样方式是采集鼻咽拭子,其他采集方式包括痰液或支气管肺泡灌洗液 。
在临床实验室检测中,如果在患者样本中能够检测到新冠病毒的特定核酸序列,则应表明该患者可能感染了新冠病毒 。
但是,有些患者可能会出现假阴性结果 。核酸检测假阴性结果与多种因素有关 。
2.核酸检测为什么会有假阴性结果?
图  2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果?

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症状不同
部分患者在疾病早期无明显症状,上呼吸道和鼻咽部病毒量可能较少,可能出现检测不到的情况,导致假阴性结果 。而且,新冠病毒的病程和结果还不完全清楚,最佳采样时机也不确定 。特别是该病的潜伏期较长,绝大多数患者就诊时可能已延误数日至数周 。现在是鼻咽拭子检测的最佳时期吗?样本中的病毒载量是否还在方法学检测的范围内?仍有待确定 。
采样不一样
采样点的准确性与个体操作者有一定的关系 。如果采样人员操作不准确或不规范,也可能出现采样错误 。
套件质量参差不齐
面对疫情的严峻形势,目前核酸试剂盒研发时间短,产品稳定性不高 。在现阶段的特殊时期,这些试剂无法保证在临床应用前进行必要的方法学验证,难以排除大规模人群中个体样本扩增区域突变导致假阴性的可能性 。另外,不同厂家生产的核酸检测试剂盒质量参差不齐,也会影响检测结果 。
标本运输限制
RNA病毒的核酸由于自身降解和生物酶介导的降解,是最难稳定储存的生物分子之一 。样品的保存直接影响检测结果 。建议将含有RNA病毒的样本保存在专门的病毒保存液中,并在冷藏状态下尽快运输检查 。作为新发现的RNA病毒,新冠病毒可能对储存和运输有更高的要求 。但是,目前大部分医院在采集样本后需要将样本送到疾控中心进行统一检测 。从采样到实际测试可能需要很长时间 。采样医院和检测实验室是否具备专业的样本保存和低温运输能力,
3.面对严峻的疫情,如何提高新冠肺炎确诊率?
图  2.核酸检测为什么会出现假阴性的结果?

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标准化流程
核酸检测是一个连贯且受控的过程 。从采样→保存送样→病毒灭活→提取裂解核酸→检测,必须保证每个环节的操作规范,否则无法提取到足够有效的病毒核酸 。因此,必须严格规范操作,提高检测结果的准确性 。
多点采样,重复检测
疑似患者应从鼻咽拭子、痰液、支气管肺泡灌洗液等多点取样,或同一部位重复核酸检测,结合临床症状,确保诊断准确 。
CT检查与核酸检测相结合