菌种保存用什么培养基 菌种保存( 五 )


(四)石蜡隔氧封藏 具体做法是将液态石蜡分装入三角瓶内 , 装量达瓶空间的1/3 , 塞好棉塞 , 于121℃灭菌2小时 , 然后置40℃温箱中 , 使其水分蒸发 , 或置于干燥器内数日以除去水分 , 石蜡呈透明状为宜 。在无菌条件下 , 用无菌吸管装入已长好菌丝的斜面试管 , 使液面高出斜面顶部1厘米左右 。塞上无菌橡皮塞 , 竖直保存 。此法可使菌种存活3年以上 , 但以1~2年移植一次为好 。移植时不必倒出石蜡 , 用接种钩取一块菌丝即可 。因转移时带有石蜡 , 菌丝生长弱 , 需要再转管1~2次 , 方能复壮 。
菌种保存有什么方法
1、液体石蜡覆盖法:他是指斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡 , 不但可以阻止氧气进入 , 同时又可以避免菌种死亡 。
2、就是在动物、昆虫、鸡胚内感染并传代 , 此法相当于一般微生物的传代培养保藏法 。
3、是将微生物吸附在适当的载体 , 如土壤、沙子、硅胶、滤纸上 , 而后进行干燥的保藏法 。
4、可以用低温冰箱 , 干冰酒精快速冻结 , 氮气等保存 。
5、先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻 , 然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥) 。
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菌种保存三种主要方法 菌种保存的方法有哪些
1、斜面低温保藏法:将菌种接种到适合的固体斜面培养基上 , 等到菌种充分生长过后 , 使用油纸将棉塞部分包扎好 , 然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存 。如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌 , 一般可以保存2-4个月左右 , 需要移种一次 。如果是酵母菌 , 一般可以保存2个月左右 , 需要每个月移种一次 。
2、液体石蜡覆盖保藏法:将液体石蜡装在三角烧瓶中 , 并使用棉塞塞好 , 用牛皮纸进行包扎 , 然后在0.1MPa , 121.3℃的环境下灭菌30分钟左右 , 接着将其放置在40℃的温箱之中 , 将水汽蒸发掉 。将需要保藏的菌种 , 用适合的斜面培养基进行培养 , 得到健壮的孢子或者是菌体 。使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出 , 注入斜面上 , 用量为高出斜面顶端1cm左右为宜 。将试管直立 , 放置在低温或者是室温之下进行保存 。霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死 , 酵母菌可以保藏1-2年 , 一般无芽孢细菌可以保藏1年 , 脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下) 。
【菌种保存用什么培养基菌种保存】3、滤纸保藏法:准备好滤纸条(0.5×1.2cm) , 安瓿管(0.6×8cm) , 然后每个安瓿管放置1-2张滤纸条 , 塞上棉塞 , 在0.1MPa , 121℃的环境下灭菌30分钟左右 。将菌种在适合的斜面培养基上培养 , 得到健壮的菌体 。在灭菌培养皿中滴加1-2ml的灭菌脱脂牛乳 , 并取数环菌苔在牛乳内混合均匀 , 制成浓悬液 , 然后使用镊子从安瓿管中取出滤纸条 , 浸入菌悬液中 , 吸饱后 , 放回安瓿管中 , 塞上棉塞 。将安瓿管放入干燥器中(内有五氧化二磷作吸水剂) , 并用真空泵抽气至干 。将棉花塞入管内 , 用火焰熔封 , 然后放置在低温环境下保存 。