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血平板培养基【血平板培养基】血平板培养基,通用名称是血琼脂平板培养基,用于链球菌、金黄色葡萄球菌及其他苛氧菌的分离、培养及溶血活性的检测 。
基本介绍中文名:血平板培养基
外文名:Blood Agar
通用名称:血琼脂平板培养基
要求:量在抗菌药物使用前採集标本
培养基通用名称:血琼脂平板培养基
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商品名称:血平板培养基英文名称:Blood Agar血平板培养基又叫做血平板、血琼脂平板培养基,主要用于链球菌及其他苛养菌的分离、培养及溶血活性的检测 。可用于临床标本的分离、培养 。检验原理其中的蛋白胨和牛肉粉主要提供细菌生长所需要的碳源、氮源、胺基酸及维生素 。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂 。脱纤维羊血一方面提供一些特殊的生长因子,另一方面用于观察溶血反应 。主要成分蛋白胨10g牛肉粉3g氯化钠5g脱纤维羊血50mL琼脂15g去离子水1000mL样本要求1、儘量在抗菌药物使用前採集标本 。2、标本採集时应严格执行无菌操作,减少或者避免机体正常菌群及其他杂菌污染 。3、标本採集后应立即送至实验室,床边接种可提高病原菌检出率 。4、以棉拭子採集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子,宜採用插入运送培养基送检 。5、混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子,不可置肉汤培养基内送检 。6、盛标本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂 。7、送检标本应注明来源和检验目的,使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境 。检验方法1、复温:取出培养基复温至室温;2、接种:将取好的标本或菌株,採用划线、涂布或者其他方法接种于培养基;3、培养:将接种好的培养基作好标识,置于37±2℃培养箱中避光培养18~24小时,观察结果;临床标本应置于含有3~10%CO2的培养箱中培养18~24小时,观察结果 。检验结果1、溶血性链球菌通常呈现透明或半透明的灰白色小菌落(直径1mm左右),或是较大的、粗糙的、黏液样菌落(直径2~4mm) 。菌落周围环绕这溶血环,α-溶血的链球菌呈现半透明草绿色溶血环,β-溶血的链球菌呈现透明溶血环 。为了确认是否为链球菌,还应进行革兰氏染色观察,因为一些非链球菌也可在血平板培养基上形成溶血环(如大肠桿菌、铜绿假单胞菌、李斯特氏菌和溶血性葡萄球菌等) 。血平板培养基上溶血性链球菌的菌落数量对临床诊断有一定参考价值 。2、葡萄球菌通常呈现不透明的白色或金黄色菌落,周围环绕透明溶血环(β-溶血)或没有溶血环 。3、李斯特氏菌可产生较小的β-溶血环,但是可通过革兰氏染色和动力试验与链球菌区分 。4、血平板培养基为非选择性培养基,大多数非苛养菌都可生长 。局限性由于血平板培养基採用的是脱纤维羊血,其中缺乏嘧啶核苷酸,不支持流感嗜血桿菌及某些奈瑟氏菌的生长 。性能指标外观:血平板培养基应为半透明固体,表面平整,不得有裂痕 。且培养基不得有肉眼可见气泡及肉眼可见物(但允许有少量肉眼可见血纤维) 。pH:7.2±0.2无菌要求:将血平板置于37±2℃培养箱中培养7天,不得有菌生长 。质控菌检查:菌株生长情况表皮葡萄球菌(ATCC 12228)生长良好,白色菌落,不溶血化脓链球菌(ATCC 19615)生长良好,白色菌落,β-溶血肺炎链球菌(ATCC 49619)生长良好,透明菌落,α-溶血注意事项1、使用前如发现平板内培养基已经乾裂或染菌,请勿使用 。2、用于细菌纯化、接种或计数时,请在洁净的环境下操作,避免杂菌干扰 。3、开封后未使用完的培养基要及时放到冰柜冷藏储存,避免乾裂 。4、在冰柜储存较久的培养基容易出现较多的冷凝水,请在洁净环境下将水倾出,然后在培养箱放置一段时间,待其表面乾燥之后再接种 。5、弃物处理:使用后应焚烧或高压灭菌后按一般垃圾处理 。6、仅用于体外诊断 。7、仅用于专业人员 。8、本培养基含有动物来源的产品,产品和动物均已经过检验,但是不能保证无致病因子存在,应与潜在感染物同等对待本产品,採取正常安全措施处理本产品(不要肌肤接触或摄入) 。常用培养基1、哥伦比亚血琼脂+5%绵羊血(Columbia agar + 5% sheep blood)用途:用于分离难养细菌(