pbs缓冲液的作用 pbs缓冲液和pb缓冲液( 二 ) _百科达人

六、消化液
细胞生长至一定密度时，需进行传代。消化液可使细胞脱离生长表面，离散成单个细胞。常用的消化液是0.25% 、0.125％的胰蛋白酶和0.02％的二乙胺四乙酸二钠(EDTA) 溶液，以无钙镁的PBS 或Hanks 溶液配制。它们可单独使用，也可按一定比例混合后使用。大部分细胞的消化可使用终浓度为0.05%胰蛋白／0.02%EDTA 混合液。有些上皮细胞贴壁力强，需较高浓度的胰蛋白酶(0.25% ）或延长消化时间，甚至需要37°C温育。如果温育较长时间（超过20min)细胞仍不能脱壁，则应采取分步消化的措施，即将已脱壁细胞移出至离心管，加完全培养液中和胰蛋白酶的作用，对未脱壁的细胞再添加新胰蛋白酶再次消化。
七、细胞培养用的其他液体
细胞培养时，还会用到其他一些液体，如谷氨酰胺、HEPES 、丙酮酸钠、各种细胞生长因子、各种组织或细胞条件培养液，以及调整pH 使用的5.6%NaHCO3等。
谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸，在缺少谷氨酰胺时，会导致细胞因生长不良而死亡。因此，各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是，由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定，故要适时添加。可配制200 倍液体－20℃ 冰箱中保存，在使用前加入培养液内，终浓度为2mmoVL。
HEPES 是一种非离子缓冲液，在pH 7.2~7.4 范围内具有较好的缓冲能力，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES 缓冲液可与低水平的碳酸钠( 0.34g/L)共用，以抵消因额外加入HEPES 引起的渗透压增加。安全浓度范围10~25mmol/L 。丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。一些生长缓慢的细胞加入，可明显改善细胞状态。通常配制200 倍液，-20℃ 冰箱保存，在使用前加入培养液内终浓度为1mmol/L 。
另外， 2－巯基乙醇(2-Mercaptoethanol, 2-Me) 对细胞生长有很重要的作用。有人认为它相当于胎牛血清，有直接刺激细胞增殖作用。2-Me 的活性部分是硫氢基，其中一个重要作用是使血清中含硫的化合物还原成谷胱甘肽，能诱导细胞的增殖，为非特异性的激活作用。同时避免过氧化物对培养细胞的损害。另一个重要作用是促进分裂原的反应和DNA 合成，增加植物凝集素(PHA) 对淋巴细胞的转化作用，已广泛应用于杂交瘤技术。也开始用于一些难以培养的细胞。常用终浓度为5×10-5mol/L 。常配制成0.1mol/L 的储存液，用时每升培养液加0.5ml。
家里买回来的鱼，需要进行抗原检测吗？3近日，小坊在网上看到一条
有关在家中给买回来的鱼
进行抗原自测
自测结果呈阳性的视频
图片源自网络
相信很多人看了上述视频后
都会担心家里买回来的鱼
是不是也会感染新冠病毒？
那有没有必要给买回家的鱼
都进行一次抗原检测呢？
事实上，视频中的实验结果并不能说明那条鱼感染了新冠病毒。因为，抗原检测试剂盒的测试对象，说明书里标明是人体样本，如鼻拭子，而不是鱼鳃部等其他样本。进行抗原检测，要严格按照说明书来操作，这样得到的结果才有参考意义，如果操作不符合标准，得到的检测结果实际上是毫无意义的。
就好像此前网友们用橙子、橙汁、可乐等做抗原检测实验一样，非人体样本的检测，都会导致抗原测试系统的紊乱。
新冠病毒抗原检测试纸条，采用胶体金免疫层析法或乳胶法。即在进行抗原检测时，要求在采样后，把采样棒放入到试剂盒配套提供的样本提取液中，经挤压后，再把管子内的液体滴在试剂板条上。
上述样本提取液的主要成分，不同品牌的抗原检测产品会有所不同，如果把提取液进行交叉互换使用，或者不使用专门的提取液、以及人体样本，就没*****试剂的最优性能，简而言之就是检测失效。
抗原检测原理
新冠病毒抗原检测，应用抗原抗体特异性结合的原理，测的是病毒的结构蛋白，而胶体金则是作为显色剂，标记在对应的抗体上。
由于蛋白的相互结合主要靠氢键结合力、范德华力、静电引力、疏水作用，抗原保存液的主要成分是低离子强度的缓冲液（如PBS缓冲液、Tris缓冲液等）和表面活性剂（如Triton X-100、Brij58等），当反应体系中的盐分浓度发生改变时，抗体之间容易产生非特异性结合，从而造成假阳性结果。
大多数层析法的抗原抗体反应的最适pH值为碱性时，试剂特异性和灵敏度最优，当反应环境的pH值接近抗体等电点时，就会发生凝聚反应，造成假阳或假阴的结果。
鱼是否会感染新冠病毒？
根据文献资料显示，目前没有证据可以证明鱼类会感染新冠病毒。