菌种选育( 二 )

N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(NTG)、甲基磺酸乙酯(EMS) 、甲基亚硝基脲(NMU)、硫酸二乙酯(DES)和环氧乙烷等 。目前常用的诱变剂主要有紫外线(UV)、硫酸二乙酯、N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍(NTG)和亚硝基甲基脲(NMU)等 。后两种因有突出的诱变效果,所以被誉为“超诱变剂” 。剂量的选择受处理条件、菌种情况、诱变剂的种类等多种因素的影响 。剂量一般指强度与作用时间的乘积 。在育种实践中,常採用杀菌率来作各种诱变剂的相对剂量 。要确定一个合适的剂量,通常要进行多次试验 。在实际工作中,突变率往往随剂量的增高而提高,但达到一定程度后,再提高剂量反而会使突变率下降 。根据对紫外线、X射线和乙烯亚胺等诱变效应的研究结果,发现正变较多地出现在偏低的剂量中,而负变则较多地出现于偏高的剂量中,还发现经多次诱变而提高产量的菌株中,更容易出现负变 。因此,在诱变育种工作中,目前比较倾向于採用较低的剂量 。例如,过去在用紫外线作诱变剂时,常採用杀菌率为99%的剂量,而近年来则倾向于採用杀菌率为30%~75%的剂量 。(4)突变体的筛选 诱变处理使微生物群体中出现各种突变型,其中绝大多数是负变株 。要获得预定的效应表型主要靠科学的筛选方案和筛选方法,一般要经过初筛和复筛两个阶段的筛选 。杂交育种杂交育种杂交育种法杂交育种(bybridization)指不同种群、不同基因型个体间进行杂交,并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法 。杂交可以使双亲的基因重新组合,形成各种不同的类型,为选择提供丰富的材料;基因重组可以将双亲控制不同性状的优良基因结合于一体,或将双亲中控制同一性状的不同微效基因积累起来,产生在各该性状上超过亲本的类型 。正确选择亲杂交育种技术选择 1.选择亲本的原则首先要儘可能选用综合性状好,优点多,缺点少,优缺点或优良性状能互补的亲本,同时也要注意选用生态类型差异较大、亲缘关係较远的亲本杂交,如江西的荷包红鲤和云南的元江鲤 。在亲本中最好有一个能适应当地条件的品种 。要考虑主要的育种目标,选作育种目标的性状至少在亲本之一应十分突出 。当确定一个品种为主要改良对象,针对它的缺点进行改造才能收到好的效果,如草鱼的抗病性 。採用的组合方式 2.杂交方式亲本确定之后,採用什幺杂交组合方式,也关係育种的成败 。杂交方式通常採用的有单杂交、複合杂交、回交等杂交方式 。(1)单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示,其杂种后代称为单交种,由于简单易行、经济,所以生产上套用最广,一般主要是利用杂种第一代,如丰鲤、福寿鱼 。(2)複合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法 。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时,往往採用複合杂交,其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体,才可能从中选出更优秀的个体 。複合杂交可分为三交、双交等 。三交是一个单交种与另一品种的再杂交,可表示为(甲×乙)×丙,例如(荷包红鲤×元江鲤)×散鳞镜鲤一三杂交鲤 。双交是两个不同的单交种的杂交,可表示为(甲×乙)×(丙×丁)或(甲×丙)×(乙×丙),例如(蓝非鲫×尼罗非鲫)×(莫三比克非鲫×尼罗非鲫) 。(3)回交即杂交后代继续与其亲本之一再杂交,以加强杂种世代某一亲本性状的育种方法 。当育种目的是企图把某一群体乙的一个或几个经济性状引入另一群体甲中去,则可採用回交育种 。如鲮鱼具有许多优良性状,但不能耐受低温,需要进行遗传改良 。可先用耐受低温的湘华鲮与鲮杂交,杂交子一代再与鲮回交,回交后代继续同鲮进行多次回交,对回交子代选择的注意力必须集中在抗寒性这个目标性状上,从而最终育成一个具有抗寒性的优良的 。基因工程育种随着DNA的内部结构和遗传机制的秘密一点一点呈现在人们眼前,特别是当人们了解到遗传密码是由RNA转录表达的以后,生物学家不再仅仅满足于探索、提示生物遗传的秘密,而是开始跃跃欲试,构想在分子的水平上去干预生物的遗传特性 。如果将一种生物的DNA中的某个遗传密码片断连线到另外一种生物的DNA链上去,将DNA重新组织一下,就可以按照人类的愿望,设计出新的遗传物质并创造出新的生物类型,这与过去培育生物繁殖后代的传统做法完全不同 。这种做法就像技术科学的工程设计,按照人类的需要把这种生物的这个“基因”与那种生物的那个“基因”重新“施工”,“组装”成新的基因组合,创造出新的生物 。这种完全按照人的意愿,由重新组装基因到新生物产生的生物科学技术,就称为“基因工程”,或者说是“遗传工程” 。基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程 。所谓基因工程(genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的複杂技术,是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内複製、转录、翻译表达的操作 。它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来,在离体条件下用适当的工具酶进行切割后,把它与作为载体的DNA分子连线起来,然后与载体一起导入某一更易生长、繁殖的受体细胞中,以让外源物质在其中“安家落户”,进行正常的複製和表达,从而获得新物种的一种崭新技术 。