口蹄疫、猪水疱病反向间接血凝试验致敏红细胞诊断液 _生活百科

口蹄疫、猪水疱病反向间接血凝试验致敏红细胞诊断液药品信息本品系用口蹄疫病毒A、O、C、Asia I型毒种和猪水疱病病毒毒种分别高度免疫豚鼠或猪，分离血清，提取免疫球蛋白，致敏红细胞製成。用于口蹄疫和水疱病的鉴别诊断。性状静置后，致敏红细胞沉于瓶底，上层为淡黄色透明液体。振摇后，致敏红细胞均匀分散于溶液中。用途用于鉴别诊断VI蹄疫和水疱病的反向间接血凝试验。用法判定(1)使用标準阳性血清对O型口蹄疫和猪水疱病进行鉴别诊断时，按以下方法。a.在96孔血凝滴定板上，每份被检样品做4排孔，每孔先各加25tzL稀释液。b.每排第1孔各加被检样品25tuL，然后分别由左至右进行2倍系列稀释至第7孔(竖板)或第11孔(横板) 。每排最后孔留作空白对照。c.加标準阳性血清在第1排和第3排，每孔加稀释液25p-L 。在第2排，每孔加入1：20稀释的O型口蹄疫标準阳性血清25I生L 。在第4排，每孔加入1：100稀释的猪水疱病标準阳性血清259L 。放微型混合器上振荡1-2min，加盖，置37℃作用30min 。d.加致敏红细胞诊断液在第1排和第2排，每孔加入1%O型口蹄疫抗体致敏红细胞悬液25p.L 。在第3排和第4排孔，每孔加入1%猪水疱病抗体致敏红细胞悬液25uL 。将血凝滴定板置微型混合器上振荡1-2min，加盖，放室温2h后观察结果。e.结果判定若第1排出现2孔以上的凝集(50%以上凝集)，且第2排相对应孔出现2个孔以上的凝集抑制；第3、4排不出现凝集，判为口蹄疫O型阳性。若第3排出现2个孔以上的凝集(50%以上凝集)，并且第4排对应孔出现2个孔以上的凝集抑制，第1、2排不出现凝集，则判为猪水疱病阳性。以能引起50%红细胞凝集的被检样品最大稀释度为被检样品的血凝效价。(2)使用标準抗原对口蹄疫各型和猪水疱病进行鉴别诊断时，按下列方法操作。a.被检样品的稀释取试管8支，自第1管开始由左至右用稀释液进行2倍系列稀释(即1：6、1：12、1：24……1：768)，每管0.5mL 。b.滴加被检样品在血凝滴定板上的第1至第5排，每排的第8孔滴加第8管稀释被检样品2滴，每排的第7孔滴加第7管稀释被检样品2滴，以此类推至第1孔。每排的第9孔滴加稀释液2滴，作为稀释液对照，每排的第10孔按顺序分别滴加A、O、C、Asia工型口蹄疫和猪水疱病标準抗原(1：30稀释)各2滴，作为阳性对照(注意每型换滴管1支) 。C.滴加致敏红细胞诊断液先将红细胞诊断液摇匀，于滴定板第1至第5排孔分别滴加A、0、C、Asia I口蹄疫及猪水疱病致敏红细胞诊断液，每孔1滴，置振荡器上振荡1-2分钟，放置20-25℃，1.5-2小时后判定结果。如果被检样品来自牛、羊等偶蹄兽，仅用口蹄疫4个型的致敏红细胞诊断液；如果被检材料来自猪，除用上述4种诊断液外，还用猪水疱病红细胞诊断液。d.结果判定(a)观察血凝板上各排孔的凝集图形，如果只有第1排孔凝集，且稀释液对照孔不凝集，阳性对照孔凝集，则证明此种凝集是与A型红细胞诊断液同型病毒所致的特异性凝集，被检样品即判为A型。若只有第2排孔凝集，其余4排孔不凝集，则待检抗原为O型，以此类推。(b)致敏红细胞50%凝集的被检样品最高稀释度为其凝集效价。(c)出现2排孔以上的凝集时，如某排孔的凝集效价高于其余各排孔的凝集效价至少4倍，即可判为阳性，其余判为阴性。注意事项保存与使用中，勿冻结，勿倒置。贮藏在2-8℃，有效期为6个月。附注：凝集反映强度标準 ++++ 100%凝集。红细胞均匀地分布于孔底周围。+++ 75%凝集。红细胞均匀地分布于孔底周围，但孔底中心有红细胞形成的针尖大的小点。++50%凝集。孔底周围有不均匀的红细胞分布，孔底有一红细胞沉下的小点。+25%凝集。孔底周围有不均匀的红细胞分布，但大部分红细胞已沉积于孔底。一不凝集。红细胞完全沉积于孔底成一圆点。