凝胶色谱法GPC仪器原理

在做GPC测试时 , 科学指南针在与很多同学沟通中了解到 , 好多同学对GPC测试不太了解 , 对其仪器原理 , 仍是小白阶段 , 针对此 , 科学指南针组织相关同事对网上海量知识进行整理 , 希望可以帮助到科研圈的伙伴们;
分析原理:样品通过凝胶柱时 , 按分子的流体力学体积不同进行分离 , 大分子先流出
谱图的表示方法:柱后流出物浓度随保留值的变化
提供的信息:高聚物的平均分子量及其分布
根据所用凝胶的性质 , 可以分为使用水溶液的凝胶过滤色谱法(GFC)和使用有机溶剂的凝胶渗透色谱法(GPC) 。

凝胶色谱法GPC仪器原理

文章插图
只依据尺寸大小分离 , 大组分最先被洗提出
色谱固定相是多孔性凝胶 , 只有直径小于孔径的组分可以进入凝胶孔道 。大组分不能进入凝胶孔洞而被排阻 , 只能沿着凝胶粒子之间的空隙通过 , 因而最大的组分最先被洗提出来 。
直径小于孔径的组分进入凝胶孔道
凝胶色谱法GPC仪器原理

文章插图
小组分可进入大部分凝胶孔洞 , 在色谱柱中滞留时间长 , 会更慢被洗提出来 。溶剂分子因体积最小 , 可进入所有凝胶孔洞 , 因而是最后从色谱柱中洗提出 。这也是与其他色谱法最大的不同 。
依据尺寸差异 , 样品组分分离
体积排阻色谱法适用于对未知样品的探索分离 。凝胶过滤色谱适于分析水溶液中的多肽、蛋白质、生物酶等生物分子;凝胶渗透色谱主要用于高聚物(如聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯)的分子量测定 。
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