文久二年(1862年), 近藤一度获得了讲武所剑术教授的机会 。不过终因农民出身的身份而没有被正式采用 。
【历史上近藤勇是怎么死的?被谁杀死的】文久三年(1863年) , 率试卫馆天然理心流门人加盟进京浪士组 。浪士组解散后残留京都 , 成为京都守护松平容保下属 , 并与芹泽鸭一派共同成立“新撰组” 。响应幕府号召 , 募集浪人组织新撰组 , 暗杀前辈和同僚 , 肃正芹泽鸭与新见锦一派后 , 近藤勇出任新撰组局长一职 , 负责取缔尊攘派志士的工作 。
元治元年(1864年)六月五日 , 长州激进派维新志士在京都二条池田屋密谋火烧京都 , 趁乱暗杀佐幕派人物 。不料消息泄露 , 近藤勇率新撰组进攻池田屋 , 将与会人物一网打尽 , 令长州派大伤元气 。因为池田屋事件 , 新撰组一战成名 , 成为镇压尊攘派志士的急先锋 。
庆应四年(1868年) , 戊辰战争爆发 。京都伏见鸟羽一战 , 幕府军大败 , 逃往江户 , 组织甲阳镇抚队 。在甲裴胜沼、下总国流山一战中 , 为掩护其他新撰组队员及同志撤离 , 近藤勇向维新政府军投降 。因为当时幕府是维新政府“朝敌” , 近藤勇投降后 , 当局不许近藤勇以武士身份切腹自尽 , 而判其斩首 , 同年4月处斩 。
庆应四年四月二十五日 , 在板桥平尾一里冢 , 近藤勇被斩首 , 时年三十五岁(虚岁) 。
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