高效毛细管电泳法 毛细管电泳法( 二 )


毛细管电泳的基本原理
毛细管电泳的基本原理
毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳(HPCE) , 是近年来发展最快的分析方法之一 。1981年 , 和首先提出在内径为75μm的毛细管柱中利用高压进行分离 , 建立了现代毛细管电泳 。
1984年 , 等人建立了胶束毛细管电动色谱 。1987年 , 建立了毛细管等电聚焦 , Cohen和提出了毛细管凝胶电泳 。
从1988年到1989年 , 出现了之一批毛细管电泳的商用仪器 。在短短的几年时间里 , 由于满足了以生物工程为代表的生命科学各个领域对多肽、蛋白质(包括酶和抗体)、核苷酸甚至脱氧核糖核酸(DNA)的分离分析要求 , CE发展迅速 。
毛细管电泳是经典电泳技术和现代微柱分离技术相结合的产物 。与高效液相色谱相比 , 毛细管电泳的相似之处在于它是一种高效的分离技术 , 仪器操作可以自动化 , 并且两者有许多不同的分离模式 。
两者的区别在于ce用迁移时间代替了HPLC中的保留时间 , ce的分析时间通常小于30min , 比HPLC更快 。对于CE , 从理论上推导出理论塔板高度与溶质的扩散系数成正比 , 对于扩散系数小的生物大分子 , 柱效远高于HPLC 。
CE要求的样品是nl级 , 更低270fl , 流动相的量只有几毫升 , 而HPLC要求的样品是μl级 , 流动相需要几百毫升甚至更多 。但CE只能微量制备 , HPLC可用于常量制备 。
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