(2)采样用冻存管请求无菌,配置的含20%甘油和5%蔗糖的保护液无菌 。
(3)从肛门采集清新粪便样品,采样时每头猪要更改新的手套,防止交织污染 。
2.粪便样品采集和保存主意
(1)采样前准备 。①2 mL和5 mL冻存管高压灭菌(或直接购买无菌冻存管);②配置75%乙醇;③寒冻保护液配置:以配置100mL保护液为例:无菌生理盐水中加入20 mL甘油和5g蔗糖,混匀、定容到100 mL 。④液氮或干冰;⑤另外耗材:一次性手套、纸巾等 。
(2)样品采集 。①固定采样猪,用纸巾和75%乙醇擦洗肛门;②换上一次性手套,从肛门采集粪便样品;③从采集的粪便头中,取中间部分粪便2克装入2 mL冻存管,擦拭洁净冻存管,在管壁标记耳号、性辞、采样如期和年龄,立即投入液氮中;④另取中间部分粪便1克装入放有3 mL保护液的冻存管中,混匀,在管壁标记耳号、性辞、采样如期和年龄,投入液氮中 。⑤在液氮中保存,或送至实验室后转移到-80℃ 。⑥样品运输邮寄可用干冰 。
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